රෝගියාගේ සෙරුමයේ අධි-විභේදන ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂමිතික විශ්ලේෂණය භාවිතා කරමින් ඉහළ නිශ්චිතතාවයකින් යුත් නිරපේක්ෂ සහ මාරාන්තික පෙනහළු ගැටිති වෙන්කර හඳුනා ගැනීමේ පරිවෘත්තීය විද්‍යාව.

පරිගණක ටොමොග්‍රැෆි (CT) මගින් හඳුනාගත් පෙනහළු ගැටිති වල අවකල රෝග විනිශ්චය සායනික භාවිතයේදී අභියෝගයක් ලෙස පවතී. මෙහිදී, සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන්, නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති සහ අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා ඇතුළු සෙරුම් සාම්පල 480 ක ගෝලීය පරිවෘත්තීය අපි සංලක්ෂිත කරමු. ඇඩිනොකාර්සිනෝමා අද්විතීය පරිවෘත්තීය පැතිකඩ ප්‍රදර්ශනය කරන අතර, නිරපේක්ෂ ගැටිති සහ නිරෝගී පුද්ගලයින් පරිවෘත්තීය පැතිකඩවල ඉහළ සමානකමක් ඇත. සොයාගැනීම් කාණ්ඩයේ (n = 306), නිරපේක්ෂ සහ මාරාන්තික ගැටිති අතර වෙනස හඳුනා ගැනීම සඳහා පරිවෘත්තීය 27 ක කට්ටලයක් හඳුනා ගන්නා ලදී. අභ්‍යන්තර වලංගුකරණය (n = 104) සහ බාහිර වලංගුකරණය (n = 111) කාණ්ඩවල වෙනස්කම් කිරීමේ ආකෘතියේ AUC පිළිවෙලින් 0.915 සහ 0.945 විය. මාර්ග විශ්ලේෂණයෙන් හෙළි වූයේ නිරපේක්ෂ ගැටිති සහ සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන් සමඟ සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සෙරුමයේ ට්‍රිප්ටෝෆාන් අඩුවීම හා සම්බන්ධ ග්ලයිකොලිටික් පරිවෘත්තීය වැඩි වූ බවත්, ට්‍රිප්ටෝෆාන් අවශෝෂණය පෙනහළු පිළිකා සෛලවල ග්ලයිකොලිසිස් ප්‍රවර්ධනය කරන බවත්ය. CT මගින් අනාවරණය කරගත් පෙනහළු ගැටිති අවදානම තක්සේරු කිරීමේදී සෙරුම් පරිවෘත්තීය ජෛව සලකුණු වල වටිනාකම අපගේ අධ්‍යයනයෙන් ඉස්මතු කරයි.
පිළිකා රෝගීන්ගේ පැවැත්මේ අනුපාත වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා මුල් රෝග විනිශ්චය ඉතා වැදගත් වේ. එක්සත් ජනපද ජාතික පෙනහළු පිළිකා පරීක්ෂණ පරීක්ෂණය (NLST) සහ යුරෝපීය NELSON අධ්‍යයනයේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී ගොස් ඇත්තේ අඩු මාත්‍රාවකින් යුත් පරිගණක ටොමොග්‍රැෆි (LDCT) සමඟ පරීක්ෂා කිරීම මගින් අධි අවදානම් කණ්ඩායම්වල පෙනහළු පිළිකා මරණ සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළ හැකි බවයි. පෙනහළු පිළිකා පරීක්ෂාව සඳහා LDCT බහුලව භාවිතා කිරීමෙන් පසු, අසමමිතික පෙනහළු ගැටිති වල අහඹු විකිරණශීලී සොයාගැනීම් සිදුවීම අඛණ්ඩව වැඩි වී ඇත. 5. විෂ්කම්භය 3 සෙ.මී. දක්වා නාභීය පාරාන්ධතා ලෙස පෙනහළු ගැටිති අර්ථ දක්වා ඇත. LDCT හි අහඹු ලෙස අනාවරණය වූ පෙනහළු ගැටිති විශාල සංඛ්‍යාවක් සමඟ කටයුතු කිරීමේදී මාරාන්තික වීමේ සම්භාවිතාව තක්සේරු කිරීමේදී සහ කටයුතු කිරීමේදී අපට දුෂ්කරතාවන්ට මුහුණ දීමට සිදුවේ. CT හි සීමාවන් නිතර පසු විපරම් පරීක්ෂණ සහ ව්‍යාජ-ධනාත්මක ප්‍රතිඵලවලට හේතු විය හැකි අතර, අනවශ්‍ය මැදිහත්වීම් සහ අධික ප්‍රතිකාර සඳහා හේතු විය හැක6. එබැවින්, මුල් අවධියේදී පෙනහළු පිළිකා නිවැරදිව හඳුනා ගැනීමට සහ මූලික හඳුනාගැනීමේදී බොහෝ නිරපේක්ෂ ගැටිති වෙන්කර හඳුනා ගැනීමට විශ්වාසදායක සහ ප්‍රයෝජනවත් ජෛව සලකුණු සංවර්ධනය කිරීමේ අවශ්‍යතාවයක් පවතී.
ජෙනෝමික්ස්, ප්‍රෝටියොමික්ස් හෝ DNA මෙතිලේෂන් ඇතුළු රුධිරයේ (සෙරුමය, ප්ලාස්මා, පර්යන්ත රුධිර ඒක න්‍යෂ්ටික සෛල) සවිස්තරාත්මක අණුක විශ්ලේෂණය පෙනහළු පිළිකා සඳහා රෝග විනිශ්චය ජෛව සලකුණු සොයා ගැනීම කෙරෙහි වැඩි උනන්දුවක් ඇති කර තිබේ. මේ අතර, පරිවෘත්තීය ප්‍රවේශයන් මගින් ආවේණික සහ බාහිර ක්‍රියා මගින් බලපෑමට ලක්වන සෛලීය අවසාන නිෂ්පාදන මනිනු ලබන අතර එම නිසා රෝග ආරම්භය සහ ප්‍රතිඵලය පුරෝකථනය කිරීමට යොදා ගනී. ද්‍රව වර්ණදේහ-ටැන්ඩම් ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (LC-MS) යනු එහි ඉහළ සංවේදීතාව සහ විශාල ගතික පරාසය නිසා පරිවෘත්තීය අධ්‍යයනයන් සඳහා බහුලව භාවිතා වන ක්‍රමයකි, එමඟින් විවිධ භෞතික රසායනික ගුණාංග සහිත පරිවෘත්තීය ආවරණය කළ හැකිය11,12,13. පෙනහළු පිළිකා රෝග විනිශ්චය හා සම්බන්ධ ජෛව සලකුණු හඳුනා ගැනීමට ප්ලාස්මා/සෙරුමය පිළිබඳ ගෝලීය පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය භාවිතා කර ඇතත්14,15,16,17 සහ ප්‍රතිකාර කාර්යක්ෂමතාව,18 නිරපේක්ෂ සහ මාරාන්තික පෙනහළු ගැටිති අතර වෙනස හඳුනා ගැනීම සඳහා සෙරුමය පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණයන් තවමත් බොහෝ අධ්‍යයනය කිරීමට ඉතිරිව ඇත. -දැවැන්ත පර්යේෂණ.
ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සහ ස්කොමස් සෛල පිළිකා යනු කුඩා නොවන සෛල පෙනහළු පිළිකා (NSCLC) හි ප්‍රධාන උප වර්ග දෙකයි. විවිධ CT පරීක්ෂණ පරීක්ෂණවලින් පෙනී යන්නේ ඇඩිනොකාර්සිනෝමා යනු පෙනහළු පිළිකා වල වඩාත් සුලභ හිස්ටොලොජිකල් වර්ගය බවයි1,19,20,21. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන්, නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති සහ CT-අනාවරණය කරගත් ≤3 සෙ.මී. ඇතුළුව, සෙරුමය සාම්පල 695 ක පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණයක් සිදු කිරීම සඳහා අපි අතිශය ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ-ඉහළ-විභේදන ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (UPLC-HRMS) භාවිතා කළෙමු. අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සඳහා පරීක්ෂා කිරීම. පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා නිරපේක්ෂ ගැටිති සහ සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන්ගෙන් වෙන්කර හඳුනා ගන්නා සෙරුමය පරිවෘත්තීය පැනලයක් අපි හඳුනා ගත්තෙමු. මාර්ග පොහොසත් කිරීමේ විශ්ලේෂණයෙන් හෙළි වූයේ අසාමාන්‍ය ට්‍රිප්ටෝෆාන් සහ ග්ලූකෝස් පරිවෘත්තීය යනු නිරපේක්ෂ ගැටිති සහ සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන් සමඟ සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා වල පොදු වෙනස්කම් බවයි. අවසාන වශයෙන්, LDCT මගින් අනාවරණය කරගත් මාරාන්තික සහ නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති අතර වෙනස හඳුනා ගැනීම සඳහා ඉහළ නිශ්චිතතාවයක් සහ සංවේදීතාවයක් සහිත සෙරුම් පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණයක් අපි ස්ථාපිත කර වලංගු කළ අතර එය මුල් අවකල රෝග විනිශ්චය සහ අවදානම් තක්සේරුව සඳහා උපකාරී විය හැකිය.
වත්මන් අධ්‍යයනයේ දී, නිරෝගී පාලනයන් 174 දෙනෙකුගෙන්, නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති ඇති රෝගීන් 292 දෙනෙකුගෙන් සහ I අදියර පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා ඇති රෝගීන් 229 දෙනෙකුගෙන් ලිංගිකත්වය සහ වයසට ගැලපෙන සෙරුම් සාම්පල නැවත සලකා බලන ලදී. විෂයයන් 695 දෙනාගේ ජන විකාශන ලක්ෂණ අතිරේක වගුව 1 හි දක්වා ඇත.
රූපය 1a හි දැක්වෙන පරිදි, සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානයේදී සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනය (HC) 174 ක්, නිරපේක්ෂ ගැටිති (BN) 170 ක් සහ අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (LA) සාම්පල 136 ක් ඇතුළුව සෙරුම් සාම්පල 480 ක් එකතු කරන ලදී. අතිශය ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ-අධි-විභේදන ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (UPLC-HRMS) භාවිතා කරමින් ඉලක්ක නොකළ පරිවෘත්තීය පැතිකඩ සඳහා සොයාගැනීම් සමූහය. අතිරේක රූපය 1 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, වර්ගීකරණ ආකෘතියක් ස්ථාපිත කිරීමට සහ අවකල මාර්ග විශ්ලේෂණය තවදුරටත් ගවේෂණය කිරීමට LA සහ HC, LA සහ BN අතර අවකල පරිවෘත්තීය හඳුනා ගන්නා ලදී. සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානය විසින් එකතු කරන ලද සාම්පල 104 ක් සහ තවත් රෝහල් දෙකක් විසින් එකතු කරන ලද සාම්පල 111 ක් පිළිවෙලින් අභ්‍යන්තර හා බාහිර වලංගුකරණයට ලක් කරන ලදී.
අතිශය ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ-අධි-විභේදන ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (UPLC-HRMS) භාවිතයෙන් ගෝලීය සෙරුම් පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණයට භාජනය වූ සොයාගැනීම් සමූහයේ අධ්‍යයන ජනගහනයක්. b සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන් (HC, n = 174), නිරපේක්ෂ ගැටිති (BN, n = 170), සහ අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (ලොස් ඇන්ජලීස්, n = 136) ඇතුළුව අධ්‍යයන සමූහයෙන් සෙරුම් සාම්පල 480 ක මුළු පරිවෘත්තීයතාවයේ අර්ධ අවම වර්ග වෙනස්කම් කිරීමේ විශ්ලේෂණය (PLS-DA). +ESI, ධනාත්මක විද්‍යුත් ඉසින අයනීකරණ මාදිලිය, -ESI, සෘණ විද්‍යුත් ඉසින අයනීකරණ මාදිලිය. c–e ලබා දී ඇති කණ්ඩායම් දෙකක සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් බහුලත්වයක් සහිත පරිවෘත්තීය (ද්වි-වලිග විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්‍රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණය, ව්‍යාජ සොයාගැනීමේ අනුපාතය සකස් කළ p අගය, FDR <0.05) රතු (නැමීමේ වෙනස > 1.2) සහ නිල් (නැමීමේ වෙනස < 0.83) වලින් දක්වා ඇත. ) ගිනි කඳු ග්‍රැෆික් එකේ පෙන්වා ඇත. f LA සහ BN අතර සටහන් කළ පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය සංඛ්‍යාවේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් පෙන්වන ධූරාවලි පොකුරු තාප සිතියම. මූලාශ්‍ර දත්ත මූලාශ්‍ර දත්ත ගොනු ආකාරයෙන් සපයනු ලැබේ.
සොයාගැනීම් කණ්ඩායමේ 174 HC, 170 BN සහ 136 LA හි මුළු සෙරුම් පරිවෘත්තීය UPLC-HRMS විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. අපි මුලින්ම පෙන්වන්නේ තත්ත්ව පාලන (QC) සාම්පල අධීක්ෂණය නොකළ ප්‍රධාන සංරචක විශ්ලේෂණ (PCA) ආකෘතියක මධ්‍යයේ තදින් පොකුරු වී ඇති බවත්, එය වත්මන් අධ්‍යයනයේ ක්‍රියාකාරිත්වයේ ස්ථායිතාව තහවුරු කරන බවත්ය (පරිපූරක රූපය 2).
රූපය 1 b හි අර්ධ අවම වර්ග-වෙනස්කම් විශ්ලේෂණයේ (PLS-DA) පෙන්වා ඇති පරිදි, ධනාත්මක (+ESI) සහ සෘණ (−ESI) විද්‍යුත් ඉසින අයනීකරණ ක්‍රමවල LA සහ BN, LA සහ HC අතර පැහැදිලි වෙනස්කම් ඇති බව අපට පෙනී ගියේය. හුදකලා විය. කෙසේ වෙතත්, +ESI සහ -ESI තත්වයන් තුළ BN සහ HC අතර සැලකිය යුතු වෙනස්කම් හමු නොවීය.
LA සහ HC අතර අවකල ලක්ෂණ 382 ක්, LA සහ BN අතර අවකල ලක්ෂණ 231 ක් සහ BN සහ HC අතර අවකල ලක්ෂණ 95 ක් (විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්‍රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණය, FDR <0.05 සහ බහු වෙනස්වීම් >1.2 හෝ <0.83) (රූපය .1c-e) අපට හමු විය. . m/z අගය, රඳවා ගැනීමේ කාලය සහ ඛණ්ඩනය කිරීමේ ස්කන්ධ වර්ණාවලි සෙවීම (ක්‍රම අංශයේ විස්තර කර ඇත) 22 මගින් දත්ත සමුදායකට (mzCloud/HMDB/Chemspider පුස්තකාලය) එරෙහිව උච්චයන් තවදුරටත් විවරණය කරන ලදී (පරිපූරක දත්ත 3). අවසාන වශයෙන්, LA එදිරිව BN (රූපය 1f සහ පරිපූරක වගුව 2) සහ LA එදිරිව HC (පරිපූරක රූපය 3 සහ පරිපූරක වගුව 2) සඳහා පිළිවෙලින් බහුලතාවයේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් සහිත විවරණය කරන ලද පරිවෘත්තීය 33 ක් සහ 38 ක් හඳුනා ගන්නා ලදී. ඊට වෙනස්ව, PLS-DA හි BN සහ HC අතර අතිච්ඡාදනයට අනුකූලව, බහුලතාවයේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් සහිත පරිවෘත්තීය 3 ක් පමණක් BN සහ HC (පරිපූරක වගුව 2) හි හඳුනාගෙන ඇත. මෙම අවකල පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය ජෛව රසායනික ද්‍රව්‍ය රාශියක් ආවරණය කරයි (පරිපූරක රූපය 4). එකට ගත් කල, මෙම ප්‍රතිඵල මගින් සෙරුම් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් පෙන්නුම් කරන අතර එය නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති හෝ සෞඛ්‍ය සම්පන්න විෂයයන් හා සසඳන විට මුල් අවධියේ පෙනහළු පිළිකා වල මාරාන්තික පරිවර්තනය පිළිබිඹු කරයි. මේ අතර, BN සහ HC වල සෙරුම් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ සමානතාවයෙන් පෙනී යන්නේ නිරපේක්ෂ පෙනහළු ගැටිති නිරෝගී පුද්ගලයින් සමඟ බොහෝ ජීව විද්‍යාත්මක ලක්ෂණ බෙදා ගත හැකි බවයි. එපීඩර්මල් වර්ධන සාධක ප්‍රතිග්‍රාහක (EGFR) ජාන විකෘති පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා උප වර්ගය 23 හි බහුලව දක්නට ලැබෙන බැවින්, සෙරුම් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියට ධාවක විකෘති වල බලපෑම තීරණය කිරීමට අපි උත්සාහ කළෙමු. ඉන්පසු අපි පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා කාණ්ඩයේ EGFR තත්ත්වය සහිත අවස්ථා 72 ක සමස්ත පරිවෘත්තීය පැතිකඩ විශ්ලේෂණය කළෙමු. සිත්ගන්නා කරුණ නම්, PCA විශ්ලේෂණයේදී EGFR විකෘති රෝගීන් (n = 41) සහ EGFR වල් වර්ගයේ රෝගීන් (n = 31) අතර සැසඳිය හැකි පැතිකඩ අපට හමු විය (පරිපූරක රූපය 5a). කෙසේ වෙතත්, වල් වර්ගයේ EGFR (t පරීක්ෂණය, p < 0.05 සහ ගුණයක වෙනස > 1.2 හෝ < 0.83) රෝගීන් හා සසඳන විට EGFR විකෘතිය ඇති රෝගීන් තුළ බහුලත්වය සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වූ පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 7 ක් අපි හඳුනා ගත්තෙමු (පරිපූරක රූපය 5b). මෙම පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍යවලින් බහුතරයක් (7 න් 5 ක්) ඇසිල්කානිටීන් වන අතර ඒවා මේද අම්ල ඔක්සිකරණ මාර්ගවල වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි.
රූප සටහන 2 a හි දැක්වෙන කාර්ය ප්‍රවාහයේ දක්වා ඇති පරිදි, ගැටිති වර්ගීකරණය සඳහා ජෛව සලකුණු ලබා ගන්නා ලද්දේ අවම නිරපේක්ෂ හැකිලීමේ ක්‍රියාකරුවන් සහ LA (n = 136) සහ BN (n = 170) හි හඳුනාගත් අවකල පරිවෘත්තීය 33 මත පදනම්ව තෝරා ගැනීම භාවිතා කරමිනි. විචල්‍යයන්ගේ හොඳම සංයෝජනය (LASSO) - ද්විමය සැපයුම් ප්‍රතිගාමී ආකෘතිය. ආකෘතියේ විශ්වසනීයත්වය පරීක්ෂා කිරීම සඳහා දස ගුණයක හරස් වලංගුකරණය භාවිතා කරන ලදී. විචල්‍ය තේරීම සහ පරාමිති නියාමනය පරාමිතිය λ24 සමඟ සම්භාවිතා උපරිම කිරීමේ දඬුවමක් මගින් සකස් කරනු ලැබේ. ගෝලීය පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය අභ්‍යන්තර වලංගුකරණය (n = 104) සහ බාහිර වලංගුකරණය (n = 111) කණ්ඩායම් තුළ ස්වාධීනව තවදුරටත් සිදු කරන ලදී. එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස, සොයාගැනීමේ කට්ටලයේ පරිවෘත්තීය 27 ක් විශාලතම මධ්‍යන්‍ය AUC අගය සහිත හොඳම වෙනස්කම් කිරීමේ ආකෘතිය ලෙස හඳුනා ගන්නා ලදී (රූපය 2b), ඒ අතර 9 ක් BN (රූපය 2c) හා ​​සසඳන විට LA හි ක්‍රියාකාරකම් වැඩි කර ඇති අතර 18 ක් ක්‍රියාකාරකම් අඩු කර ඇත.
දස ගුණයක හරස් වලංගුකරණයක් හරහා ද්විමය ලොජිස්ටික් ප්‍රතිගාමී ආකෘතියක් භාවිතා කරමින් සොයාගැනීම් කට්ටලයේ හොඳම සෙරුම් පරිවෘත්තීය පැනලය තෝරා ගැනීම සහ අභ්‍යන්තර සහ බාහිර වලංගුකරණ කට්ටලවල පුරෝකථන කාර්ය සාධනය ඇගයීම ඇතුළුව පෙනහළු ගැටිති වර්ගීකරණයක් ගොඩනැගීම සඳහා කාර්ය ප්‍රවාහය. b පරිවෘත්තීය ජෛව සලකුණු තේරීම සඳහා LASSO ප්‍රතිගාමී ආකෘතියේ හරස් වලංගුකරණ සංඛ්‍යාලේඛන. ඉහත දක්වා ඇති සංඛ්‍යා ලබා දී ඇති λ හි තෝරාගත් ජෛව සලකුණු වල සාමාන්‍ය සංඛ්‍යාව නියෝජනය කරයි. රතු තිත් රේඛාව අනුරූප ලැම්ඩා හි සාමාන්‍ය AUC අගය නියෝජනය කරයි. අළු දෝෂ තීරු අවම සහ උපරිම AUC අගයන් නියෝජනය කරයි. තිත් රේඛාව තෝරාගත් ජෛව සලකුණු 27 සමඟ හොඳම ආකෘතිය දක්වයි. AUC, ග්‍රාහක මෙහෙයුම් ලක්ෂණය (ROC) වක්‍රය යටතේ ඇති ප්‍රදේශය. c සොයාගැනීම් කණ්ඩායමේ BN කාණ්ඩයට සාපේක්ෂව LA කාණ්ඩයේ තෝරාගත් පරිවෘත්තීය 27 ක නැමීමේ වෙනස්කම්. රතු තීරුව - සක්‍රිය කිරීම. නිල් තීරුව පහත වැටීමකි. d–f සොයාගැනීම්, අභ්‍යන්තර සහ බාහිර වලංගුකරණ කට්ටලවල පරිවෘත්තීය සංයෝජන 27 ක් මත පදනම්ව වෙනස් කොට සැලකීමේ ආකෘතියේ බලය පෙන්වන ග්‍රාහක මෙහෙයුම් ලක්ෂණය (ROC) වක්‍ර. මූලාශ්‍ර දත්ත සපයනු ලබන්නේ මූලාශ්‍ර දත්ත ගොනු ආකාරයෙන් ය.
මෙම පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 27 හි බරිත ප්‍රතිගාමී සංගුණක මත පදනම්ව පුරෝකථන ආකෘතියක් නිර්මාණය කරන ලදී (පරිපූරක වගුව 3). මෙම පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 27 මත පදනම් වූ ROC විශ්ලේෂණය මඟින් වක්‍ර (AUC) අගය 0.933 ක් යටතේ ප්‍රදේශයක් ලබා දෙන ලදී, සොයාගැනීම් කණ්ඩායම් සංවේදීතාව 0.868 ක් වූ අතර නිශ්චිතතාව 0.859 ක් විය (රූපය 2d). මේ අතර, LA සහ HC අතර විවරණය කරන ලද අවකල පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 38 අතර, පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 16 ක කට්ටලයක් HC වලින් LA වෙන්කර හඳුනා ගැනීමේදී 0.801 ක සංවේදීතාවයක් සහ 0.856 ක නිශ්චිතතාවයක් සහිත 0.902 ක AUC ලබා ගත්තේය (පරිපූරක රූපය 6a-c). අවකල පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය සඳහා විවිධ නැමීම් වෙනස් කිරීමේ සීමාවන් මත පදනම් වූ AUC අගයන් ද සංසන්දනය කරන ලදී. නැමීම් වෙනස් කිරීමේ මට්ටම 1.5 හෝ 2.0 ට සාපේක්ෂව 1.2 ලෙස සකසා ඇති විට LA සහ BN (HC) අතර වෙනස්කම් කිරීමේදී වර්ගීකරණ ආකෘතිය හොඳම ලෙස ක්‍රියා කළ බව අපට පෙනී ගියේය (පරිපූරක රූපය 7a,b). පරිවෘත්තීය කාණ්ඩ 27ක් මත පදනම් වූ වර්ගීකරණ ආකෘතිය, අභ්‍යන්තර සහ බාහිර කණ්ඩායම් තුළ තවදුරටත් වලංගු කරන ලදී. අභ්‍යන්තර වලංගුකරණය සඳහා AUC 0.915 (සංවේදීතාව 0.867, නිශ්චිතතාව 0.811) සහ බාහිර වලංගුකරණය සඳහා 0.945 (සංවේදීතාව 0.810, නිශ්චිතතාව 0.979) විය (රූපය 2e, f). අන්තර් රසායනාගාර කාර්යක්ෂමතාව තක්සේරු කිරීම සඳහා, ක්‍රම අංශයේ විස්තර කර ඇති පරිදි බාහිර කණ්ඩායමෙන් සාම්පල 40ක් බාහිර රසායනාගාරයක විශ්ලේෂණය කරන ලදී. වර්ගීකරණ නිරවද්‍යතාවය 0.925 ක AUC ලබා ගත්තේය (පරිපූරක රූපය 8). පෙනහළු ස්කොමස් සෛල පිළිකා (LUSC) පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (LUAD) ට පසු කුඩා සෛල නොවන පෙනහළු පිළිකා (NSCLC) හි දෙවන වඩාත් පොදු උප වර්ගය වන බැවින්, පරිවෘත්තීය පැතිකඩවල වලංගු විභව උපයෝගීතාව ද අපි පරීක්ෂා කළෙමු. BN සහ LUSC අවස්ථා 16ක්. LUSC සහ BN අතර වෙනස්කම් කිරීමේ AUC අගය 0.776 ක් විය (පරිපූරක රූපය 9), එය LUAD සහ BN අතර වෙනස්කම් කිරීමට සාපේක්ෂව දුර්වල හැකියාව පෙන්නුම් කරයි.
අධ්‍යයනවලින් පෙන්වා දී ඇත්තේ CT රූපවල ඇති ගැටිති වල ප්‍රමාණය මාරාන්තික වීමේ සම්භාවිතාව සමඟ ධනාත්මකව සහසම්බන්ධ වන අතර ගැටිති ප්‍රතිකාරයේ ප්‍රධාන නිර්ණායකයක් ලෙස පවතී25,26,27. NELSON පරීක්ෂණ අධ්‍යයනයේ විශාල කණ්ඩායමෙන් ලබාගත් දත්ත විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ නෝඩ් <5 mm සහිත විෂයයන්හි මාරාන්තික වීමේ අවදානම නෝඩ් නොමැති විෂයයන්හි ඇති ඒවාට සමාන බවයි28. එබැවින්, නිතිපතා CT නිරීක්ෂණය අවශ්‍ය වන අවම ප්‍රමාණය බ්‍රිතාන්‍ය උරස් සංගමය (BTS) විසින් නිර්දේශ කරන ලද පරිදි 5 mm වන අතර, ෆ්ලයිෂ්නර් සංගමය 29 විසින් නිර්දේශ කරන ලද පරිදි 6 mm වේ. කෙසේ වෙතත්, 6 mm ට වඩා විශාල සහ පැහැදිලි හිතකර ලක්ෂණ නොමැති ගැටිති, අවිනිශ්චිත පුඵ්ඵුසීය ගැටිති (IPN) ලෙස හැඳින්වේ, සායනික භාවිතයේදී ඇගයීම සහ කළමනාකරණය කිරීමේදී ප්‍රධාන අභියෝගයක් ලෙස පවතී30,31. සොයාගැනීම් සහ අභ්‍යන්තර වලංගුකරණ කණ්ඩායම් වලින් සංචිත සාම්පල භාවිතා කරමින් ගැටිති ප්‍රමාණය පරිවෘත්තීය අත්සන් වලට බලපෑවේ දැයි අපි ඊළඟට පරීක්ෂා කළෙමු. වලංගු කරන ලද ජෛව සලකුණු 27 ක් කෙරෙහි අවධානය යොමු කරමින්, අපි මුලින්ම HC සහ BN උප-6 mm පරිවෘත්තීය වල PCA පැතිකඩ සංසන්දනය කළෙමු. HC සහ BN සඳහා දත්ත ලක්ෂ්‍ය බොහොමයක් අතිච්ඡාදනය වී ඇති බව අපට පෙනී ගිය අතර, කණ්ඩායම් දෙකෙහිම සෙරුම් පරිවෘත්තීය මට්ටම් සමාන බව පෙන්නුම් කරයි (රූපය 3a). විවිධ ප්‍රමාණයේ පරාසයන් හරහා විශේෂාංග සිතියම් BN සහ LA හි සංරක්ෂණය කර ඇත (රූපය 3b, c), නමුත් 6-20 mm පරාසයේ මාරාන්තික සහ නිරපේක්ෂ ගැටිති අතර වෙන්වීමක් නිරීක්ෂණය විය (රූපය 3d). මෙම කණ්ඩායමට 0.927 ක AUC, 0.868 ක නිශ්චිතතාවයක් සහ 6 සිට 20 mm දක්වා වූ ගැටිති වල මාරාන්තික බව පුරෝකථනය කිරීම සඳහා 0.820 ක සංවේදීතාවයක් තිබුණි (රූපය 3e, f). අපගේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ, ගැටිති ප්‍රමාණය නොසලකා, මුල් මාරාන්තික පරිවර්තනය නිසා ඇතිවන පරිවෘත්තීය වෙනස්කම් වර්ගීකරණයට ග්‍රහණය කර ගත හැකි බවයි.
ad පරිවෘත්තීය 27 ක පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණයක් මත පදනම්ව නිශ්චිත කණ්ඩායම් අතර PCA පැතිකඩ සංසන්දනය කිරීම. CC සහ BN < 6 mm. b BN < 6 mm vs BN 6–20 mm. LA 6–20 mm එදිරිව LA 20–30 mm. g BN 6–20 mm සහ LA 6–20 mm. GC, n = 174; BN < 6 mm, n = 153; BN 6–20 mm, n = 91; LA 6–20 mm, n = 89; LA 20–30 mm, n = 77. e 6–20 mm ගැටිති සඳහා වෙනස්කම් කරන ලද ආකෘති කාර්ය සාධනය පෙන්වන ග්‍රාහක මෙහෙයුම් ලක්ෂණ (ROC) වක්‍රය. f 6–20 mm මනින ගැටිති සඳහා ලොජිස්ටික් ප්‍රතිගාමී ආකෘතිය මත පදනම්ව සම්භාවිතා අගයන් ගණනය කරන ලදී. අළු පැහැති තිත් රේඛාව ප්‍රශස්ත කඩඉම් අගය (0.455) නියෝජනය කරයි. ඉහත සංඛ්‍යා ලොස් ඇන්ජලීස් සඳහා ප්‍රක්ෂේපිත නඩු ප්‍රතිශතය නියෝජනය කරයි. ද්වි-වලිග සහිත ශිෂ්‍යයාගේ t පරීක්ෂණයක් භාවිතා කරන්න. PCA, ප්‍රධාන සංරචක විශ්ලේෂණය. වක්‍රය යටතේ AUC ප්‍රදේශය. මූලාශ්‍ර දත්ත මූලාශ්‍ර දත්ත ගොනු ආකාරයෙන් සපයනු ලැබේ.
යෝජිත මාරාන්තික පුරෝකථන ආකෘතියේ ක්‍රියාකාරිත්වය නිරූපණය කිරීම සඳහා සමාන පුඵ්ඵුසීය ගැටිති ප්‍රමාණයන් (මි.මී. 7–9) සහිත සාම්පල හතරක් (වයස අවුරුදු 44–61) තවදුරටත් තෝරා ගන්නා ලදී (රූපය 4a, b). මූලික පරීක්ෂාවේදී, නඩුව 1 කැල්සිකරණය සහිත ඝන ගැටයක් ලෙස ඉදිරිපත් කරන ලද අතර එය හිතකර බව හා සම්බන්ධ ලක්ෂණයක් වන අතර, නඩුව 2 පැහැදිලි හිතකර ලක්ෂණ නොමැති අවිනිශ්චිත අර්ධ වශයෙන් ඝන ගැටයක් ලෙස ඉදිරිපත් කරන ලදී. පසු විපරම් CT ස්කෑන් වට තුනකින් පෙන්නුම් කළේ මෙම අවස්ථා වසර 4 ක කාලයක් තුළ ස්ථායීව පැවති බවත් එබැවින් ඒවා හිතකර ගැටිති ලෙස සලකනු ලැබූ බවත්ය (රූපය 4a). අනුක්‍රමික CT ස්කෑන් වල සායනික ඇගයීම හා සසඳන විට, වත්මන් වර්ගීකරණ ආකෘතිය සමඟ තනි-වෙඩි සීරම් පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය සම්භාවිතා සීමාවන් මත පදනම්ව මෙම නිරෝගී ගැටිති ඉක්මනින් සහ නිවැරදිව හඳුනාගෙන ඇත (වගුව 1). 3 වන අවස්ථාවේ රූපය 4b ප්ලූරල් ඉවත් කිරීමේ සලකුණු සහිත ගැටයක් පෙන්වයි, එය බොහෝ විට මාරාන්තික බව සමඟ සම්බන්ධ වේ32. 4 වන අවස්ථාව නිරපේක්ෂ හේතුවක් පිළිබඳ සාක්ෂි නොමැති අවිනිශ්චිත අර්ධ වශයෙන් ඝන ගැටයක් ලෙස ඉදිරිපත් කර ඇත. වර්ගීකරණ ආකෘතියට අනුව මෙම සියලු අවස්ථා මාරාන්තික ලෙස පුරෝකථනය කරන ලදී (වගුව 1). පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා තක්සේරුව පෙනහළු වෙන් කිරීමේ සැත්කමෙන් පසු හිස්ටෝපාතික පරීක්ෂණයෙන් පෙන්නුම් කරන ලදී (රූපය 4b). බාහිර වලංගුකරණ කට්ටලය සඳහා, පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණ යන්ත්‍රය 6 mm ට වඩා විශාල අවිනිශ්චිත පෙනහළු ගැටිති දෙකක් නිවැරදිව පුරෝකථනය කළේය (පරිපූරක රූපය 10).
නිරපේක්ෂ ගැටිති ඇති අවස්ථා දෙකක පෙනහළු වල අක්ෂීය කවුළුවේ CT රූප. 1 වන අවස්ථාවේ දී, වසර 4 කට පසු CT ස්කෑන් පරීක්ෂණයෙන් දකුණු පහළ කොටසෙහි කැල්සියම්කරණය සහිත 7 mm ප්‍රමාණයේ ස්ථායී ඝන ගැටයක් පෙන්නුම් කරන ලදී. 2 වන අවස්ථාවේ දී, වසර 5 කට පසු CT ස්කෑන් පරීක්ෂණයෙන් දකුණු ඉහළ කොටසෙහි 7 mm විෂ්කම්භයක් සහිත ස්ථායී, අර්ධ වශයෙන් ඝන ගැටයක් අනාවරණය විය. b පෙනහළු වල අක්ෂීය කවුළුව CT රූප සහ පෙනහළු වෙන් කිරීමට පෙර අදියර I ඇඩිනොකාර්සිනෝමා අවස්ථා දෙකක අනුරූප ව්යාධිජනක අධ්‍යයන. 3 වන අවස්ථාවෙහිදී ප්ලූරල් ආපසු ගැනීම සමඟ දකුණු ඉහළ කොටසෙහි 8 mm විෂ්කම්භයක් සහිත ගැටයක් අනාවරණය විය. 4 වන අවස්ථාවෙහිදී වම් ඉහළ කොටසෙහි 9 mm ප්‍රමාණයේ අර්ධ වශයෙන් ඝන බිම් වීදුරු ගැටයක් අනාවරණය විය. පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා හි ඇසිනාර් වර්ධන රටාව පෙන්නුම් කරන, වෙන් කරන ලද පෙනහළු පටක වල හෙමැටොක්සිලින් සහ ඉයෝසින් (H&E) පැල්ලම් කිරීම (පරිමාණ තීරුව = 50 μm). ඊතල මඟින් CT රූපවල අනාවරණය වූ ගැටිති පෙන්නුම් කරයි. H&E රූප යනු රෝග විශේෂඥයා විසින් පරීක්ෂා කරන ලද බහු (>3) අන්වීක්ෂීය ක්ෂේත්‍රවල නියෝජිත රූප වේ.
එකට ගත් කල, අපගේ ප්‍රතිඵල මගින් පෙනහළු ගැටිති වල අවකල රෝග විනිශ්චය කිරීමේදී සෙරුම් පරිවෘත්තීය ජෛව සලකුණු වල විභව වටිනාකම පෙන්නුම් කරන අතර, CT පරීක්ෂාව ඇගයීමේදී අභියෝග ඇති කළ හැකිය.
වලංගු කරන ලද අවකල පරිවෘත්තීය පැනලයක් මත පදනම්ව, ප්‍රධාන පරිවෘත්තීය වෙනස්කම් වල ජීව විද්‍යාත්මක සහසම්බන්ධතා හඳුනා ගැනීමට අපි උත්සාහ කළෙමු. MetaboAnalyst විසින් KEGG මාර්ග පොහොසත් කිරීමේ විශ්ලේෂණය මඟින් ලබා දී ඇති කණ්ඩායම් දෙක අතර සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් වූ පොදු මාර්ග 6 ක් හඳුනා ගන්නා ලදී (LA vs. HC සහ LA vs. BN, සකස් කරන ලද p ≤ 0.001, බලපෑම > 0.01). මෙම වෙනස්කම් පයිරුවේට් පරිවෘත්තීය, ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය, නියාසින් සහ නිකොටිනාමයිඩ් පරිවෘත්තීය, ග්ලයිකොලිසිස්, TCA චක්‍රය සහ පියුරීන් පරිවෘත්තීය බාධා මගින් සංලක්ෂිත විය (රූපය 5a). නිරපේක්ෂ ප්‍රමාණකරණය භාවිතයෙන් ප්‍රධාන වෙනස්කම් සත්‍යාපනය කිරීම සඳහා අපි ඉලක්කගත පරිවෘත්තීය තවදුරටත් සිදු කළෙමු. අව්‍යාජ පරිවෘත්තීය ප්‍රමිතීන් භාවිතා කරමින් ත්‍රිත්ව චතුර්ධ්‍රැව ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (QQQ) මගින් බහුලව වෙනස් කරන ලද මාර්ගවල පොදු පරිවෘත්තීය තීරණය කිරීම. පරිවෘත්තීය අධ්‍යයන ඉලක්ක නියැදියේ ජනවිකාස ලක්ෂණ අතිරේක වගුව 4 හි ඇතුළත් කර ඇත. අපගේ ගෝලීය පරිවෘත්තීය ප්‍රතිඵලවලට අනුකූලව, ප්‍රමාණාත්මක විශ්ලේෂණයෙන් තහවුරු වූයේ BN සහ HC වලට සාපේක්ෂව LA හි හයිපොක්සැන්තයින් සහ සැන්තයින්, පයිරුවේට් සහ ලැක්ටේට් වැඩි වී ඇති බවයි (රූපය 5b, c, p <0.05). කෙසේ වෙතත්, BN සහ HC අතර මෙම පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍යවල සැලකිය යුතු වෙනස්කම් හමු නොවීය.
BN සහ HC කාණ්ඩ හා සසඳන විට LA කාණ්ඩයේ සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍යවල KEGG මාර්ග පොහොසත් කිරීමේ විශ්ලේෂණය. වලිග දෙකක ගෝලීය පරීක්ෂණයක් භාවිතා කරන ලද අතර, Holm-Bonferroni ක්‍රමය භාවිතයෙන් p අගයන් සකස් කරන ලදී (ගැලපුම් කරන ලද p ≤ 0.001 සහ බලපෑම් ප්‍රමාණය > 0.01). LC-MS/MS (n = කාණ්ඩයකට 70) මගින් තීරණය කරන ලද සෙරුමය HC, BN සහ LA හි හයිපොක්සැන්තයින්, සැන්තයින්, ලැක්ටේට්, පයිරුවේට් සහ ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම් පෙන්වන b–d වයලීන බිම් කොටස් පිළිවෙලින් මධ්‍ය සහ කාර්තුමය පෙන්නුම් කරයි. LUAD-TCGA දත්ත කට්ටලයේ සාමාන්‍ය පෙනහළු පටක (n = 59) හා සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (n = 513) හි SLC7A5 සහ QPRT හි සාමාන්‍යකරණය කළ Log2TPM (මිලියනයකට පිටපත්) mRNA ප්‍රකාශනය පෙන්වන e වයලීන බිම් කොටස. සුදු කොටුව අන්තර් කාර්තු පරාසය නියෝජනය කරයි, මධ්‍යයේ ඇති තිරස් කළු රේඛාව මධ්‍යය නියෝජනය කරයි, සහ කොටුවෙන් විහිදෙන සිරස් කළු රේඛාව 95% විශ්වාසනීය පරතරය (CI) නියෝජනය කරයි. f පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (n = 513) හි SLC7A5 සහ GAPDH ප්‍රකාශනයේ පියර්සන් සහසම්බන්ධතා කුමන්ත්‍රණය සහ TCGA දත්ත කට්ටලයේ සාමාන්‍ය පෙනහළු පටක (n = 59). අළු ප්‍රදේශය 95% CI නියෝජනය කරයි. r, පියර්සන් සහසම්බන්ධතා සංගුණකය. g LC-MS/MS විසින් තීරණය කරන ලද නිශ්චිත නොවන shRNA පාලනය (NC) සහ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) සමඟ මාරු කරන ලද A549 සෛලවල සාමාන්‍යකරණය කරන ලද සෛලීය ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම්. එක් එක් කාණ්ඩයේ ජීව විද්‍යාත්මකව ස්වාධීන සාම්පල පහක සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය ඉදිරිපත් කෙරේ. h A549 සෛල (NC) සහ SLC7A5 නොක්ඩවුන් A549 සෛල (Sh1, Sh2) හි NADt (NAD+ සහ NADH ඇතුළුව මුළු NAD) සෛලීය මට්ටම්. එක් එක් කාණ්ඩයේ ජීව විද්‍යාත්මකව ස්වාධීන සාම්පල තුනක සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණය ඉදිරිපත් කෙරේ. i SLC7A5 knockdown ට පෙර සහ පසු A549 සෛලවල ග්ලයිකොලිටික් ක්‍රියාකාරිත්වය බාහිර සෛලීය ආම්ලිකකරණ අනුපාතය (ECAR) මගින් මනිනු ලැබීය (n = කණ්ඩායමකට ජීව විද්‍යාත්මකව ස්වාධීන සාම්පල 4). 2-DG,2-deoxy-D-glucose. වලිග දෙකකින් යුත් ශිෂ්‍යයාගේ t පරීක්ෂණය (b–h) හි භාවිතා කරන ලදී. (g–i) හි, දෝෂ තීරු මධ්‍යන්‍ය ± SD නියෝජනය කරයි, සෑම අත්හදා බැලීමක්ම ස්වාධීනව තුන් වතාවක් සිදු කරන ලද අතර ප්‍රතිඵල සමාන විය. මූලාශ්‍ර දත්ත මූලාශ්‍ර දත්ත ගොනු ආකාරයෙන් සපයනු ලැබේ.
LA කාණ්ඩයේ වෙනස් වූ ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ සැලකිය යුතු බලපෑම සැලකිල්ලට ගනිමින්, QQQ භාවිතා කරමින් HC, BN සහ LA කාණ්ඩවල සෙරුම් ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම් ද අපි තක්සේරු කළෙමු. HC හෝ BN සමඟ සසඳන විට LA හි සෙරුම් ට්‍රිප්ටෝෆාන් අඩු වී ඇති බව අපට පෙනී ගියේය (p < 0.001, රූපය 5d), එය පාලන කණ්ඩායමේ සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන්ට වඩා පෙනහළු පිළිකා ඇති රෝගීන් තුළ සංසරණය වන ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම් අඩු බවට පෙර සොයාගැනීම් වලට අනුකූල වේ33,34,35. PET/CT ට්‍රේසර් 11C-methyl-L-triptophan භාවිතා කළ තවත් අධ්‍යයනයකින් හෙළි වූයේ පෙනහළු පිළිකා පටක වල ට්‍රිප්ටෝෆාන් සංඥා රඳවා ගැනීමේ කාලය නිරපේක්ෂ තුවාල හෝ සාමාන්‍ය පටක වලට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වී ඇති බවයි36. LA සෙරුමයේ ට්‍රිප්ටෝෆාන් අඩුවීම පෙනහළු පිළිකා සෛල මගින් ක්‍රියාකාරී ට්‍රිප්ටෝෆාන් අවශෝෂණය පිළිබිඹු කළ හැකි බව අපි උපකල්පනය කරමු.
ට්‍රිප්ටෝෆාන් කැටබොලිස්මයේ කයිනුරේනීන් මාර්ගයේ අවසාන නිෂ්පාදනය NAD+37,38 බව ද දන්නා අතර එය ග්ලයිකොලිසිස් හි 1,3-බිස්ෆොස්ෆොග්ලිසරේට් සමඟ ග්ලයිසෙරල්ඩිහයිඩ්-3-පොස්පේට් ප්‍රතික්‍රියාව සඳහා වැදගත් උපස්ථරයකි39. පෙර අධ්‍යයනයන් ප්‍රතිශක්තිකරණ නියාමනයේ ට්‍රිප්ටෝෆාන් කැටබොලිස්මයේ භූමිකාව කෙරෙහි අවධානය යොමු කර ඇතත්, වත්මන් අධ්‍යයනයේ නිරීක්ෂණය කරන ලද ට්‍රිප්ටෝෆාන් අක්‍රමිකතා නියාමනය සහ ග්ලයිකොලිටික් මාර්ග අතර අන්තර් ක්‍රියාකාරිත්වය පැහැදිලි කිරීමට අපි උත්සාහ කළෙමු. ද්‍රාව්‍ය ප්‍රවාහක පවුල 7 සාමාජික 5 (SLC7A5) ට්‍රිප්ටෝෆාන් ප්‍රවාහකයෙකු ලෙස හැඳින්වේ43,44,45. ක්විනොලිනික් අම්ලය ෆොස්ෆොරිබොසයිල්ට්‍රාන්ස්ෆෙරේස් (QPRT) යනු කයිනුරේනීන් මාර්ගයේ පහළින් පිහිටා ඇති එන්සයිමයක් වන අතර එය ක්විනොලිනික් අම්ලය NAMN46 බවට පරිවර්තනය කරයි. LUAD TCGA දත්ත කට්ටලය පරීක්ෂා කිරීමේදී SLC7A5 සහ QPRT යන දෙකම සාමාන්‍ය පටක හා සසඳන විට පිළිකා පටක වල සැලකිය යුතු ලෙස ඉහළ නංවා ඇති බව අනාවරණය විය (රූපය 5e). මෙම වැඩිවීම පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමාවේ I සහ II අදියරවල මෙන්ම III සහ IV අදියරවලද නිරීක්ෂණය විය (පරිපූරක රූපය 11), එය පිළිකා උත්පාදනය හා සම්බන්ධ ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ මුල් බාධා පෙන්නුම් කරයි.
මීට අමතරව, LUAD-TCGA දත්ත කට්ටලය පිළිකා රෝගීන්ගේ සාම්පලවල SLC7A5 සහ GAPDH mRNA ප්‍රකාශනය අතර ධනාත්මක සහසම්බන්ධයක් පෙන්නුම් කළේය (r = 0.45, p = 1.55E-26, රූපය 5f). ඊට වෙනස්ව, සාමාන්‍ය පෙනහළු පටක වල එවැනි ජාන අත්සන් අතර සැලකිය යුතු සහසම්බන්ධයක් හමු නොවීය (r = 0.25, p = 0.06, රූපය 5f). A549 සෛලවල SLC7A5 (පරිපූරක රූපය 12) තට්ටු කිරීම සෛලීය ට්‍රිප්ටෝෆාන් සහ NAD(H) මට්ටම් සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කළේය (රූපය 5g,h), එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස බාහිර සෛලීය ආම්ලිකකරණ අනුපාතය (ECAR) මගින් මනිනු ලබන පරිදි දුර්වල වූ ග්ලයිකොලිටික් ක්‍රියාකාරිත්වය ඇති විය (රූපය 1). 5i). මේ අනුව, සෙරුමය සහ විට්‍රෝ හඳුනාගැනීමේ පරිවෘත්තීය වෙනස්කම් මත පදනම්ව, ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලිය කයිනුරීන් මාර්ගය හරහා NAD+ නිපදවිය හැකි බවත් පෙනහළු පිළිකා වල ග්ලයිකොලිසිස් ප්‍රවර්ධනය කිරීමේදී වැදගත් කාර්යභාරයක් ඉටු කරන බවත් අපි උපකල්පනය කරමු.
LDCT මගින් අනාවරණය කරගත් අවිනිශ්චිත පුඵ්ඵුසීය ගැටිති විශාල සංඛ්‍යාවක් PET-CT, පෙනහළු ජෛව පරීක්ෂණ සහ මාරාන්තික රෝග පිළිබඳ ව්‍යාජ-ධනාත්මක රෝග විනිශ්චයක් හේතුවෙන් අධික ලෙස ප්‍රතිකාර කිරීම වැනි අතිරේක පරීක්ෂණ සඳහා අවශ්‍යතාවයට හේතු විය හැකි බව අධ්‍යයනවලින් පෙන්වා දී ඇත. 31 රූපය 6 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, අපගේ අධ්‍යයනය මගින් CT මගින් අනාවරණය කරගත් පුඵ්ඵුසීය ගැටිති වල අවදානම් ස්ථරීකරණය සහ පසුව කළමනාකරණය වැඩිදියුණු කළ හැකි විභව රෝග විනිශ්චය අගයක් සහිත සෙරුමය පරිවෘත්තීය පැනලයක් හඳුනාගෙන ඇත.
පෙනහළු ගැටිති තක්සේරු කරනු ලබන්නේ අඩු මාත්‍රාවකින් යුත් පරිගණක ටොමොග්‍රැෆි (LDCT) භාවිතයෙන් වන අතර එමඟින් හිතකර හෝ මාරාන්තික හේතූන් පෙන්නුම් කරන රූප ලක්ෂණ පෙන්නුම් කරයි. ගැටිති වල අවිනිශ්චිත ප්‍රතිඵලය නිතර පසු විපරම් චාරිකා, අනවශ්‍ය මැදිහත්වීම් සහ අධික ලෙස ප්‍රතිකාර කිරීමට හේතු විය හැක. රෝග විනිශ්චය වටිනාකමක් ඇති සෙරුම් පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණ ඇතුළත් කිරීම අවදානම් තක්සේරුව සහ පසුව පෙනහළු ගැටිති කළමනාකරණය වැඩිදියුණු කළ හැකිය. PET පොසිට්‍රෝන විමෝචන ටොමොග්‍රැෆි.
ඇමරිකා එක්සත් ජනපද NLST අධ්‍යයනයේ සහ යුරෝපීය NELSON අධ්‍යයනයේ දත්ත වලට අනුව, අඩු මාත්‍රාවකින් යුත් පරිගණක ටොමොග්‍රැෆි (LDCT) සහිත අධි අවදානම් කණ්ඩායම් පරීක්ෂා කිරීමෙන් පෙනහළු පිළිකා මරණ අනුපාතය අඩු කළ හැකිය. කෙසේ වෙතත්, LDCT මගින් අනාවරණය කරගත් අහඹු පුඵ්ඵුසීය ගැටිති විශාල සංඛ්‍යාවක අවදානම් තක්සේරුව සහ පසුව සායනික කළමනාකරණය වඩාත්ම අභියෝගාත්මක වේ. ප්‍රධාන ඉලක්කය වන්නේ විශ්වාසදායක ජෛව සලකුණු ඇතුළත් කිරීමෙන් පවතින LDCT-පාදක ප්‍රොටෝකෝලවල නිවැරදි වර්ගීකරණය ප්‍රශස්ත කිරීමයි.
රුධිර පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය වැනි ඇතැම් අණුක ජෛව සලකුණු, පෙනහළු පිළිකා සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන් සමඟ සංසන්දනය කිරීමෙන් හඳුනාගෙන ඇත15,17. වත්මන් අධ්‍යයනයේ දී, LDCT මගින් අහඹු ලෙස අනාවරණය කරගත් නිරෝගී සහ මාරාන්තික පෙනහළු ගැටිති අතර වෙනස හඳුනා ගැනීම සඳහා සෙරුම් පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය යෙදීම කෙරෙහි අපි අවධානය යොමු කළෙමු. UPLC-HRMS විශ්ලේෂණය භාවිතයෙන් අපි ගෝලීය සෙරුම් පරිවෘත්තීය සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනය (HC), නිරෝගී පෙනහළු ගැටිති (BN) සහ අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (LA) සාම්පල සංසන්දනය කළෙමු. HC සහ BN වලට සමාන පරිවෘත්තීය පැතිකඩ ඇති බව අපට පෙනී ගිය අතර, LA HC සහ BN වලට සාපේක්ෂව සැලකිය යුතු වෙනස්කම් පෙන්නුම් කළේය. LA HC සහ BN වලින් වෙන්කර හඳුනා ගන්නා සෙරුම් පරිවෘත්තීය කට්ටල දෙකක් අපි හඳුනා ගත්තෙමු.
නිරපේක්ෂ සහ මාරාන්තික ගැටිති සඳහා වත්මන් LDCT මත පදනම් වූ හඳුනාගැනීමේ යෝජනා ක්‍රමය ප්‍රධාන වශයෙන් කාලයත් සමඟ ගැටිති වල ප්‍රමාණය, ඝනත්වය, රූප විද්‍යාව සහ වර්ධන වේගය මත පදනම් වේ30. පෙර අධ්‍යයනයන් පෙන්වා දී ඇත්තේ ගැටිති වල ප්‍රමාණය පෙනහළු පිළිකා ඇතිවීමේ සම්භාවිතාවට සමීපව සම්බන්ධ බවයි. ඉහළ අවදානම් සහිත රෝගීන් තුළ පවා, නෝඩ් <6 mm හි මාරාන්තික අවදානම <1% වේ. 6 සිට 20 mm දක්වා ප්‍රමාණයේ ගැටිති සඳහා මාරාන්තික අවදානම 8% සිට 64% දක්වා පරාසයක පවතී30. එබැවින්, ෆ්ලයිෂ්නර් සංගමය සාමාන්‍ය CT පසු විපරම් සඳහා 6 mm ක කැපුම් විෂ්කම්භයක් නිර්දේශ කරයි. 29 කෙසේ වෙතත්, 6 mm ට වඩා විශාල අවිනිශ්චිත පෙනහළු ගැටිති (IPN) අවදානම් තක්සේරු කිරීම සහ කළමනාකරණය ප්‍රමාණවත් ලෙස සිදු කර නොමැත 31. සංජානනීය හෘද රෝග සඳහා වත්මන් කළමනාකරණය සාමාන්‍යයෙන් පදනම් වන්නේ නිතර නිතර CT නිරීක්ෂණය සමඟ සුපරීක්ෂාකාරීව බලා සිටීම මත ය.
වලංගු කරන ලද පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලිය මත පදනම්ව, නිරෝගී පුද්ගලයින් සහ නිරෝගී ගැටිති <6 මි.මී. අතර පරිවෘත්තීය අත්සන් අතිච්ඡාදනය වීම අපි ප්‍රථම වරට පෙන්නුම් කළෙමු. ජීව විද්‍යාත්මක සමානතාවය පෙර CT සොයාගැනීම් සමඟ අනුකූල වන අතර ගැටිති <6 මි.මී. සඳහා මාරාන්තික වීමේ අවදානම නෝඩ් නොමැති විෂයයන් සඳහා තරම් අඩුය.30 අපගේ ප්‍රතිඵල මගින් පෙන්නුම් කරන්නේ පරිවෘත්තීය පැතිකඩවල නිරපේක්ෂ ගැටිති <6 මි.මී. සහ ≥6 මි.මී. ඉහළ සමානකමක් ඇති බවයි, එමඟින් ගැටිති ප්‍රමාණය නොසලකා නිරපේක්ෂ හේතු විද්‍යාවේ ක්‍රියාකාරී අර්ථ දැක්වීම අනුකූල බව යෝජනා කෙරේ. මේ අනුව, නවීන රෝග විනිශ්චය සෙරුම් පරිවෘත්තීය පැනල් මඟින් CT හි ගැටිති මුලින් අනාවරණය වූ විට සහ අනුක්‍රමික අධීක්ෂණය අඩු කළ හැකි විට රීතියක් ලෙස තනි තක්සේරුවක් සැපයිය හැකිය. ඒ සමඟම, පරිවෘත්තීය ජෛව සලකුණු වල එකම පුවරුව මාරාන්තික ගැටිති ≥6 මි.මී. ප්‍රමාණයෙන් නිරෝගී ගැටිති වලින් වෙන්කර හඳුනාගත් අතර CT රූපවල සමාන ප්‍රමාණයේ සහ අපැහැදිලි රූප විද්‍යාත්මක ලක්ෂණ සහිත IPN සඳහා නිවැරදි අනාවැකි ලබා දුන්නේය. මෙම සෙරුම් පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණය 0.927 ක AUC සහිත ≥6 මි.මී. ගැටිති වල මාරාන්තික බව පුරෝකථනය කිරීමේදී හොඳින් ක්‍රියා කළේය. එකට ගත් කල, අපගේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ අද්විතීය සෙරුම් පරිවෘත්තීය අත්සන් මගින් මුල් පිළිකා-ප්‍රේරිත පරිවෘත්තීය වෙනස්කම් විශේෂයෙන් පිළිබිඹු කළ හැකි බවත්, ගැටිති ප්‍රමාණයෙන් ස්වාධීනව අවදානම් පුරෝකථනය කරන්නන් ලෙස විභව වටිනාකමක් ඇති බවත්ය.
විශේෂයෙන්, පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා (LUAD) සහ ස්කොමස් සෛල පිළිකා (LUSC) කුඩා සෛල නොවන පෙනහළු පිළිකා (NSCLC) වල ප්‍රධාන වර්ග වේ. LUSC දුම්කොළ භාවිතය සමඟ දැඩි ලෙස සම්බන්ධ වී ඇති නිසා සහ CT පරීක්ෂාවේදී අනාවරණය වූ අහඹු පෙනහළු ගැටිති වල වඩාත් සුලභ හිස්ටොලොජිය LUAD වන නිසා48, අපගේ වර්ගීකරණ ආකෘතිය විශේෂයෙන් අදියර I ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සාම්පල සඳහා ගොඩනගා ඇත. වැන්ග් සහ සගයන් LUAD කෙරෙහි ද අවධානය යොමු කළ අතර නිරෝගී පුද්ගලයින්ගෙන් මුල් අවධියේ පෙනහළු පිළිකා වෙන්කර හඳුනා ගැනීම සඳහා ලිපිඩමික්ස් භාවිතයෙන් ලිපිඩ අත්සන් නවයක් හඳුනා ගත්හ17. අපි අදියර I LUSC අවස්ථා 16 ක් සහ නිරපේක්ෂ ගැටිති 74 ක් මත වත්මන් වර්ගීකරණ ආකෘතිය පරීක්ෂා කළ අතර අඩු LUSC පුරෝකථන නිරවද්‍යතාවයක් (AUC 0.776) නිරීක්ෂණය කළෙමු, එයින් යෝජනා කරන්නේ LUAD සහ LUSC වලට තමන්ගේම පරිවෘත්තීය අත්සන් තිබිය හැකි බවයි. ඇත්ත වශයෙන්ම, LUAD සහ LUSC හේතු විද්‍යාව, ජීව විද්‍යාත්මක සම්භවය සහ ජානමය අපගමනයන්ගෙන් වෙනස් වන බව පෙන්වා දී ඇත49. එබැවින්, පරීක්ෂණ වැඩසටහන් වලදී පෙනහළු පිළිකා ජනගහනය මත පදනම් වූ හඳුනාගැනීම සඳහා පුහුණු ආකෘතිවලට වෙනත් ආකාරයේ හිස්ටොලොජි ඇතුළත් කළ යුතුය.
මෙහිදී, සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන් සහ නිරපේක්ෂ ගැටිති සමඟ සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා වල නිතර වෙනස් වන මාර්ග හය අපි හඳුනා ගත්තෙමු. සැන්තයින් සහ හයිපොක්සැන්තයින් යනු පියුරීන් පරිවෘත්තීය මාර්ගයේ පොදු පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය වේ. අපගේ ප්‍රතිඵලවලට අනුකූලව, පියුරීන් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියට සම්බන්ධ අතරමැදි, නිරෝගී පාලනයන් හෝ පූර්ව ආක්‍රමණශීලී අවධියේ සිටින රෝගීන් සමඟ සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා ඇති රෝගීන්ගේ සෙරුමය හෝ පටක වල සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය15,50. ඉහළ ගිය සෙරුම් සැන්තයින් සහ හයිපොක්සැන්තයින් මට්ටම් පිළිකා සෛල වේගයෙන් ප්‍රගුණනය වීමෙන් අවශ්‍ය ඇනබොලිස්වාදය පිළිබිඹු කළ හැකිය. ග්ලූකෝස් පරිවෘත්තීය අක්‍රමිකතාව පිළිකා පරිවෘත්තීයතාවයේ ප්‍රසිද්ධ ලක්ෂණයකි51. මෙහිදී, HC සහ BN කාණ්ඩයට සාපේක්ෂව LA කාණ්ඩයේ පයිරුවේට් සහ ලැක්ටේට් වල සැලකිය යුතු වැඩි වීමක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු, එය කුඩා සෛල නොවන පෙනහළු පිළිකා (NSCLC) රෝගීන්ගේ සහ සෞඛ්‍ය සම්පන්න පාලනයන්හි සෙරුම් පරිවෘත්තීය පැතිකඩවල ග්ලයිකොලිටික් මාර්ග අසාමාන්‍යතා පිළිබඳ පෙර වාර්තාවලට අනුකූල වේ. ප්‍රතිඵල අනුකූල වේ52,53.
වැදගත් ලෙස, පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා වල සෙරුමය තුළ පයිරුවේට් සහ ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය අතර ප්‍රතිලෝම සහසම්බන්ධයක් අපි නිරීක්ෂණය කළෙමු. HC හෝ BN කාණ්ඩයට සාපේක්ෂව LA කාණ්ඩයේ සෙරුම් ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම් අඩු විය. සිත්ගන්නා කරුණ නම්, අනාගත කණ්ඩායමක් භාවිතා කරමින් කරන ලද පෙර මහා පරිමාණ අධ්‍යයනයකින් හෙළි වූයේ සංසරණය වන ට්‍රිප්ටෝෆාන් අඩු මට්ටම් පෙනහළු පිළිකා ඇතිවීමේ අවදානම වැඩි කිරීම සමඟ සම්බන්ධ වී ඇති බවයි 54. ට්‍රිප්ටෝෆාන් යනු අපට සම්පූර්ණයෙන්ම ආහාර වලින් ලැබෙන අත්‍යවශ්‍ය ඇමයිනෝ අම්ලයකි. පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා වල සෙරුම් ට්‍රිප්ටෝෆාන් ක්ෂය වීම මෙම පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ වේගවත් ක්ෂය වීම පිළිබිඹු කළ හැකි බව අපි නිගමනය කරමු. කයිනුරේනීන් මාර්ගය හරහා ට්‍රිප්ටෝෆාන් කැටබොලිස්මයේ අවසාන නිෂ්පාදනය ඩි නව NAD+ සංස්ලේෂණයේ ප්‍රභවය බව හොඳින් දන්නා කරුණකි. NAD+ ප්‍රධාන වශයෙන් ගැලවීමේ මාර්ගය හරහා නිපදවන බැවින්, සෞඛ්‍ය සහ රෝග සඳහා ට්‍රිප්ටෝෆාන් පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේදී NAD+ හි වැදගත්කම තීරණය කළ යුතුය46. TCGA දත්ත සමුදාය පිළිබඳ අපගේ විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ සාමාන්‍ය පාලනයන් හා සසඳන විට පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා හි ට්‍රිප්ටෝෆාන් ප්‍රවාහක ද්‍රාව්‍ය ප්‍රවාහක 7A5 (SLC7A5) හි ප්‍රකාශනය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වී ඇති බවත් එය GAPDH ග්ලයිකොලිටික් එන්සයිමයේ ප්‍රකාශනය සමඟ ධනාත්මකව සහසම්බන්ධ වී ඇති බවත්ය. පෙර අධ්‍යයනයන් ප්‍රධාන වශයෙන් අවධානය යොමු කර ඇත්තේ ප්‍රති-පිළිකා ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරය මර්දනය කිරීමේදී ට්‍රිප්ටෝෆාන් කැටබොලිස්මේ කාර්යභාරය කෙරෙහි ය40,41,42. පෙනහළු පිළිකා සෛලවල SLC7A5 තට්ටු කිරීමෙන් ට්‍රිප්ටෝෆාන් අවශෝෂණය නිෂේධනය කිරීමෙන් සෛලීය NAD මට්ටම්වල පසුකාලීන අඩුවීමක් සහ ග්ලයිකොලිටික් ක්‍රියාකාරිත්වයේ සමගාමී දුර්වල වීමක් සිදුවන බව මෙහිදී අපි පෙන්නුම් කරමු. සාරාංශයක් ලෙස, පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා හි මාරාන්තික පරිවර්තනය හා සම්බන්ධ සෙරුමය පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියේ වෙනස්කම් සඳහා අපගේ අධ්‍යයනය ජීව විද්‍යාත්මක පදනමක් සපයයි.
EGFR විකෘති යනු NSCLC රෝගීන් තුළ බහුලව දක්නට ලැබෙන ධාවක විකෘති වේ. අපගේ අධ්‍යයනයේදී, EGFR විකෘතිය (n = 41) ඇති රෝගීන්ට වල් වර්ගයේ EGFR (n = 31) ඇති රෝගීන්ට සමාන සමස්ත පරිවෘත්තීය පැතිකඩ ඇති බව අපට පෙනී ගියේය, නමුත් ඇසිල්කාර්නයිටින් රෝගීන්ගේ සමහර EGFR විකෘති රෝගීන්ගේ සෙරුමය මට්ටම් අඩුවීම අපට හමු විය. ඇසිල්කාර්නයිටින් වල ස්ථාපිත කාර්යය වන්නේ සයිටොප්ලාස්මයේ සිට මයිටොකොන්ඩ්‍රියල් අනුකෘතියට ඇසයිල් කණ්ඩායම් ප්‍රවාහනය කිරීමයි, එමඟින් ශක්තිය නිපදවීමට මේද අම්ල ඔක්සිකරණය වේ 55. අපගේ සොයාගැනීම් වලට අනුකූලව, මෑත කාලීන අධ්‍යයනයකින් පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා පටක සාම්පල 102 ක ගෝලීය පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය කිරීමෙන් EGFR විකෘති සහ EGFR වල් වර්ගයේ පිළිකා අතර සමාන පරිවෘත්තීය පැතිකඩ ද හඳුනා ගන්නා ලදී. සිත්ගන්නා කරුණ නම්, EGFR විකෘති කාණ්ඩයේ ඇසිල්කාර්නයිටින් අන්තර්ගතය ද සොයා ගන්නා ලදී. එබැවින්, ඇසිල්කාර්නයිටින් මට්ටම්වල වෙනස්කම් EGFR-ප්‍රේරිත පරිවෘත්තීය වෙනස්කම් පිළිබිඹු කරන්නේද යන්න සහ යටින් පවතින අණුක මාර්ග තවදුරටත් අධ්‍යයනය කිරීම වටී.
අවසාන වශයෙන්, අපගේ අධ්‍යයනය මගින් පෙනහළු ගැටිති වල අවකල රෝග විනිශ්චය සඳහා සෙරුම් පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණයක් ස්ථාපිත කරන අතර CT ස්කෑන් පරීක්ෂාව මත පදනම්ව අවදානම් තක්සේරුව ප්‍රශස්ත කළ හැකි සහ සායනික කළමනාකරණයට පහසුකම් සැලසිය හැකි වැඩ ප්‍රවාහයක් යෝජනා කරයි.
මෙම අධ්‍යයනය සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා රෝහලේ ආචාර ධර්ම කමිටුව, සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාලයේ පළමු අනුබද්ධ රෝහල සහ ෂෙන්ෂෝ විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා රෝහලේ ආචාර ධර්ම කමිටුව විසින් අනුමත කරන ලදී. සොයාගැනීම් සහ අභ්‍යන්තර වලංගුකරණ කණ්ඩායම් වලදී, නිරෝගී පුද්ගලයින්ගෙන් සේරා 174 ක් සහ නිරෝගී ගැටිති වලින් සේරා 244 ක් සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානයේ පිළිකා පාලන හා වැළැක්වීමේ දෙපාර්තමේන්තුවේ වාර්ෂික වෛද්‍ය පරීක්ෂණවලට භාජනය වන පුද්ගලයින්ගෙන් සහ නිරෝගී ගැටිති 166 ක් එකතු කරන ලදී. සෙරුමය. අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානයෙන් එකතු කරන ලදී. බාහිර වලංගුකරණ කණ්ඩායම තුළ, නිරෝගී ගැටිති 48 ක්, සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාලයේ පළමු අනුබද්ධ රෝහලෙන් අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා අවස්ථා 39 ක් සහ ෂෙන්ෂෝ පිළිකා රෝහලෙන් අදියර I පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා අවස්ථා 24 ක් තිබුණි. ස්ථාපිත පරිවෘත්තීය වර්ගීකරණයේ රෝග විනිශ්චය කිරීමේ හැකියාව පරීක්ෂා කිරීම සඳහා සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානය I අදියර ස්කොමස් සෛල පෙනහළු පිළිකා රෝගීන් 16 දෙනෙකු ද එකතු කරන ලදී (රෝගියාගේ ලක්ෂණ අතිරේක වගුව 5 හි දක්වා ඇත). 2018 ජනවාරි සහ 2020 මැයි අතර සොයාගැනීම් සමූහයෙන් සහ අභ්‍යන්තර වලංගුකරණ සමූහයෙන් සාම්පල එකතු කරන ලදී. බාහිර වලංගුකරණ සමූහය සඳහා සාම්පල 2021 අගෝස්තු සහ 2022 ඔක්තෝබර් අතර එකතු කරන ලදී. ස්ත්‍රී පුරුෂ භාවය අවම කිරීම සඳහා, එක් එක් සමූහයට ආසන්න වශයෙන් සමාන පිරිමි සහ ගැහැණු රෝගීන් සංඛ්‍යාවක් පවරන ලදී. සොයාගැනීම් කණ්ඩායම සහ අභ්‍යන්තර සමාලෝචන කණ්ඩායම. ස්වයං වාර්තාව මත පදනම්ව සහභාගිවන්නාගේ ලිංගභේදය තීරණය කරන ලදී. සියලුම සහභාගිවන්නන්ගෙන් දැනුවත් කැමැත්ත ලබා ගත් අතර කිසිදු වන්දියක් ලබා දී නොමැත. බාහිර වලංගුකරණ සාම්පලයෙන් එක් අවස්ථාවක් හැර, විශ්ලේෂණය කරන අවස්ථාවේ දී අවුරුදු 2 සිට 5 දක්වා ස්ථාවර CT ස්කෑන් ලකුණු ඇති අය නිරෝගී ගැටිති සහිත විෂයයන් වූ අතර, එය පූර්ව ශල්‍යකර්මයෙන් එකතු කර හිස්ටෝපාත විද්‍යාව මගින් රෝග විනිශ්චය කරන ලදී. නිදන්ගත බ්රොන්කයිටිස් හැර. පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා රෝගීන් පෙනහළු වෙන් කිරීමට පෙර එකතු කරන ලද අතර ව්යාධිජනක රෝග විනිශ්චය මගින් තහවුරු කරන ලදී. නිරාහාර රුධිර සාම්පල කිසිදු ප්‍රතිදේහජනකයක් නොමැතිව සෙරුමය වෙන් කිරීමේ නලවල එකතු කරන ලදී. කාමර උෂ්ණත්වයේ දී රුධිර සාම්පල පැය 1 ක් කැටි ගැසුණු අතර පසුව සෙරුමය සුපිරි ද්‍රව්‍ය එකතු කිරීම සඳහා 4°C දී මිනිත්තු 10 ක් 2851 × g දී කේන්ද්‍රාපසාරී කරන ලදී. සෙරුමය ඇල්කොහොල් පරිවෘත්තීය නිස්සාරණය වන තෙක් -80°C දී ශීත කරන ලදී. සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාල පිළිකා මධ්‍යස්ථානයේ පිළිකා වැළැක්වීමේ සහ වෛද්‍ය පරීක්ෂණ දෙපාර්තමේන්තුව වයස අවුරුදු 40 සිට 55 දක්වා පිරිමින් සහ කාන්තාවන් සමාන සංඛ්‍යාවක් ඇතුළුව නිරෝගී පරිත්‍යාගශීලීන් 100 දෙනෙකුගෙන් සෙරුමය තටාකයක් එකතු කරන ලදී. සෑම පරිත්‍යාගශීලී සාම්පලයකම සමාන පරිමාවන් මිශ්‍ර කරන ලද අතර, ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ලැබුණු තටාකය ඇල්කොහොල් කර -80°C දී ගබඩා කරන ලදී. තත්ත්ව පාලනය සහ දත්ත ප්‍රමිතිකරණය සඳහා සෙරුමය මිශ්‍රණය යොමු ද්‍රව්‍යයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී.
යොමු සෙරුමය සහ පරීක්ෂණ සාම්පල දියවන ලද අතර ඒකාබද්ධ නිස්සාරණ ක්‍රමයක් (MTBE/මෙතනෝල්/ජලය) භාවිතයෙන් පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය නිස්සාරණය කරන ලදී 56. කෙටියෙන් කිවහොත්, සෙරුමය 50 μl අයිස්-සීතල මෙතනෝල් 225 μl සහ අයිස්-සීතල මෙතිල් ටර්ට්-බියුටයිල් ඊතර් (MTBE) 750 μl සමඟ මිශ්‍ර කරන ලදී. මිශ්‍රණය කලවම් කර පැය 1 ක් අයිස් මත ඉන්කියුබේට් කරන්න. ඉන්පසු සාම්පල මිශ්‍ර කර අභ්‍යන්තර ප්‍රමිතීන් අඩංගු MS-ශ්‍රේණියේ ජලය 188 μl (13C-ලැක්ටේට්, 13C3-පයිරුවේට්, 13C-මෙතියොනීන් සහ 13C6-අයිසොලියුසීන්, කේම්බ්‍රිජ් සමස්ථානික රසායනාගාරවලින් මිලදී ගන්නා ලදී) 15,000 × g හි මිනිත්තු 10 ක් සඳහා 4 °C දී කේන්ද්‍රාපසාරී කරන ලද අතර, පහළ අවධිය ධනාත්මක සහ සෘණ ආකාරවලින් LC-MS විශ්ලේෂණය සඳහා නල දෙකකට (එක් එක් 125 μL) මාරු කරන ලදී. අවසානයේදී, නියැදිය අධිවේගී රික්ත සාන්ද්‍රණයක වියළීමට වාෂ්ප කරන ලදී.
වියලන ලද පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය 80% ඇසිටොනයිට්‍රයිල් 120 μl හි ප්‍රතිනිර්මාණය කර, මිනිත්තු 5 ක් සඳහා සුළි සුළඟට සකසා, මිනිත්තු 10 ක් සඳහා 4°C දී කේන්ද්‍රාපසාරී කරන ලදී. පරිවෘත්තීය අධ්‍යයනයන් සඳහා ක්ෂුද්‍ර ඇතුළු කිරීම් සහිත ඇම්බර් වීදුරු කුප්පිවලට සුපිරි ද්‍රව්‍ය මාරු කරන ලදී. අතිශය ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ-ඉහළ-විභේදන ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (UPLC-HRMS) වේදිකාවක් මත ඉලක්ක නොකළ පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය. ඩයොනෙක්ස් අල්ටිමේට් 3000 UPLC පද්ධතියක් සහ ACQUITY BEH Amide තීරුවක් (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) භාවිතයෙන් පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය වෙන් කරන ලදී. ධනාත්මක අයන මාදිලියේදී, ජංගම අදියර 95% (A) සහ 50% ඇසිටොනයිට්‍රයිල් (B) වූ අතර, ඒ සෑම එකක්ම 10 mmol/L ඇමෝනියම් ඇසිටේට් සහ 0.1% ෆෝමික් අම්ලය අඩංගු විය. සෘණ මාදිලියේදී, ජංගම අවධි A සහ ​​B හි පිළිවෙලින් 95% සහ 50% ඇසිටොනයිට්‍රයිල් අඩංගු වූ අතර, අදියර දෙකෙහිම ඇමෝනියම් ඇසිටේට් 10 mmol/L අඩංගු විය, pH = 9. අනුක්‍රමික වැඩසටහන පහත පරිදි විය: 0–0.5 min, 2% B; 0.5–12 min, 2–50% B; 12–14 min, 50–98% B; 14–16 min, 98% B; 16–16.1. min, 98 –2% B; 16.1–20 min, 2% B. තීරුව 40°C දී සහ නියැදිය 10°C දී ස්වයංක්‍රීය සාම්පල් යන්ත්‍රයේ පවත්වා ගෙන යන ලදී. ප්‍රවාහ අනුපාතය 0.3 ml/min වූ අතර, එන්නත් පරිමාව 3 μl විය. ඉලෙක්ට්‍රෝස්ප්‍රේ අයනීකරණ (ESI) ප්‍රභවයක් සහිත Q-Exactive Orbitrap ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂයක් (Thermo Fisher Scientific) සම්පූර්ණ ස්කෑන් මාදිලියේ ක්‍රියාත්මක කර විශාල දත්ත ප්‍රමාණයක් රැස් කිරීම සඳහා ddMS2 අධීක්ෂණ මාදිලිය සමඟ සම්බන්ධ කරන ලදී. MS පරාමිතීන් පහත පරිදි සකසා ඇත: ඉසින වෝල්ටීයතාවය +3.8 kV/- 3.2 kV, කේශනාලිකා උෂ්ණත්වය 320°C, ආවරණ වායුව 40 arb, සහායක වායුව 10 arb, පරීක්ෂණ තාපක උෂ්ණත්වය 350°C, ස්කෑන් කිරීමේ පරාසය 70–1050 m/h, විභේදනය. 70 000. Xcalibur 4.1 (Thermo Fisher Scientific) භාවිතයෙන් දත්ත ලබා ගන්නා ලදී.
දත්තවල ගුණාත්මකභාවය තක්සේරු කිරීම සඳහා, එක් එක් සාම්පලයෙන් සුපිරි ද්‍රව්‍යයේ 10 μL ඇල්කොහොල් ඉවත් කිරීමෙන් සංචිත තත්ත්ව පාලන (QC) සාම්පල ජනනය කරන ලදී. UPLC-MS පද්ධතියේ ස්ථායිතාව තක්සේරු කිරීම සඳහා විශ්ලේෂණාත්මක අනුපිළිවෙල ආරම්භයේදී තත්ත්ව පාලන සාම්පල එන්නත් හයක් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. තත්ත්ව පාලන සාම්පල පසුව වරින් වර කණ්ඩායමට හඳුන්වා දෙනු ලැබේ. මෙම අධ්‍යයනයේ ඇති සියලුම සෙරුම් සාම්පල කාණ්ඩ 11 LC-MS විසින් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. නිස්සාරණ ක්‍රියාවලිය නිරීක්ෂණය කිරීමට සහ කාණ්ඩයෙන් කාණ්ඩයට බලපෑම් සඳහා ගැලපීම සඳහා නිරෝගී පරිත්‍යාගශීලීන් 100 දෙනෙකුගෙන් සෙරුම් තටාක මිශ්‍රණයක ඇල්කොහොල් අදාළ කාණ්ඩවල යොමු ද්‍රව්‍ය ලෙස භාවිතා කරන ලදී. සොයාගැනීමේ සමුහය, අභ්‍යන්තර වලංගුකරණ සමුහය සහ බාහිර වලංගුකරණ සමුහය පිළිබඳ ඉලක්ක නොකළ පරිවෘත්තීය විශ්ලේෂණය සන් යාට්-සෙන් විශ්ව විද්‍යාලයේ පරිවෘත්තීය මධ්‍යස්ථානයේදී සිදු කරන ලදී. ගුවැන්ඩොං තාක්ෂණ විශ්ව විද්‍යාලයේ විශ්ලේෂණ සහ පරීක්ෂණ මධ්‍යස්ථානයේ බාහිර රසායනාගාරය වර්ගීකරණ ආකෘතියේ ක්‍රියාකාරිත්වය පරීක්ෂා කිරීම සඳහා බාහිර සමුහයෙන් සාම්පල 40 ක් ද විශ්ලේෂණය කළේය.
නිස්සාරණය සහ ප්‍රතිසංවිධානයෙන් පසුව, බහු ප්‍රතික්‍රියා නිරීක්ෂණ (MRM) මාදිලියේ විද්‍යුත් ඉසින අයනීකරණ (ESI) ප්‍රභවයක් සහිත අතිශය ඉහළ කාර්ය සාධන ද්‍රව වර්ණදේහ-ටැන්ඩම් ස්කන්ධ වර්ණාවලීක්ෂය (Agilent 6495 ත්‍රිත්ව චතුරස්‍රය) භාවිතයෙන් සෙරුම් පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍යවල නිරපේක්ෂ ප්‍රමාණනය මනිනු ලැබීය. පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය වෙන් කිරීම සඳහා ACQUITY BEH Amide තීරුවක් (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) භාවිතා කරන ලදී. ජංගම අවධිය 90% (A) සහ 5% ඇසිටොනයිට්‍රයිල් (B) 10 mmol/L ඇමෝනියම් ඇසිටේට් සහ 0.1% ඇමෝනියා ද්‍රාවණයකින් සමන්විත විය. අනුක්‍රමික වැඩසටහන පහත පරිදි විය: 0–1.5 min, 0% B; 1.5–6.5 min, 0–15% B; 6.5–8 min, 15% B; 8–8.5 min, 15% B; 8.5–11.5 min, 0%B. ස්වයංක්‍රීය සාම්පල් යන්ත්‍රයේ තීරුව 40 °C සහ නියැදිය 10 °C හි පවත්වා ගෙන යන ලදී. ප්‍රවාහ අනුපාතය 0.3 mL/min වූ අතර එන්නත් පරිමාව 1 μL විය. MS පරාමිතීන් පහත පරිදි සකසා ඇත: කේශනාලිකා වෝල්ටීයතාවය ±3.5 kV, නෙබියුලයිසර් පීඩනය 35 psi, කොපු වායු ප්‍රවාහය 12 L/min, කොපු වායු උෂ්ණත්වය 350°C, වියළන වායු උෂ්ණත්වය 250°C සහ වියළන වායු ප්‍රවාහය 14 l/min. ට්‍රිප්ටෝෆාන්, පයිරුවේට්, ලැක්ටේට්, හයිපොක්සැන්තයින් සහ සැන්තයින් වල MRM පරිවර්තන පිළිවෙලින් 205.0–187.9, 87.0–43.4, 89.0–43.3, 135.0–92.3 සහ 151.0–107. 9. Mass Hunter B.07.00 (Agilent Technologies) භාවිතයෙන් දත්ත රැස් කරන ලදී. සෙරුම් සාම්පල සඳහා, ට්‍රිප්ටෝෆාන්, පයිරුවේට්, ලැක්ටේට්, හයිපොක්සැන්තයින් සහ සැන්තයින් සම්මත මිශ්‍රණ ද්‍රාවණවල ක්‍රමාංකන වක්‍ර භාවිතයෙන් ප්‍රමාණනය කරන ලදී. සෛල සාම්පල සඳහා, ට්‍රිප්ටෝෆාන් අන්තර්ගතය අභ්‍යන්තර ප්‍රමිතියට සහ සෛල ප්‍රෝටීන් ස්කන්ධයට සාමාන්‍යකරණය කරන ලදී.
උපරිම නිස්සාරණය (m/z සහ රඳවා ගැනීමේ කාලය (RT)) Compound Discovery 3.1 සහ TraceFinder 4.0 (Thermo Fisher Scientific) භාවිතයෙන් සිදු කරන ලදී. කාණ්ඩ අතර විභව වෙනස්කම් ඉවත් කිරීම සඳහා, පරීක්ෂණ සාම්පලයේ සෑම ලාක්ෂණික උච්චයක්ම සාපේක්ෂ බහුලත්වය ලබා ගැනීම සඳහා එකම කාණ්ඩයෙන් යොමු ද්‍රව්‍යයේ ලාක්ෂණික උච්චයෙන් බෙදන ලදී. ප්‍රමිතිකරණයට පෙර සහ පසු අභ්‍යන්තර ප්‍රමිතීන්හි සාපේක්ෂ සම්මත අපගමනයන් අතිරේක වගුව 6 හි දක්වා ඇත. කණ්ඩායම් දෙක අතර වෙනස්කම් ව්‍යාජ සොයාගැනීමේ අනුපාතය (FDR<0.05, විල්කොක්සන් අත්සන් කළ ශ්‍රේණිගත කිරීමේ පරීක්ෂණය) සහ නැමීමේ වෙනස (>1.2 හෝ <0.83) මගින් සංලක්ෂිත විය. නිස්සාරණය කරන ලද ලක්ෂණ සහ යොමු සෙරුමය-නිවැරදි කරන ලද MS දත්තවල අමු MS දත්ත පිළිවෙලින් අතිරේක දත්ත 1 සහ අතිරේක දත්ත 2 හි දක්වා ඇත. හඳුනාගත් පරිවෘත්තීය, අනුමාන වශයෙන් විවරණ කළ සංයෝග, අනුමාන වශයෙන් සංලක්ෂිත සංයෝග පන්ති සහ නොදන්නා සංයෝග ඇතුළුව නිර්වචනය කරන ලද හඳුනාගැනීමේ මට්ටම් හතරක් මත පදනම්ව උපරිම විවරණ සිදු කරන ලදී 22 . Compound Discovery 3.1 (mzCloud, HMDB, Chemspider) හි දත්ත සමුදා සෙවීම් මත පදනම්ව, MS/MS ගැලපෙන වලංගු ප්‍රමිතීන් සහිත ජීව විද්‍යාත්මක සංයෝග හෝ mzCloud (ලකුණු > 85) හෝ Chemspider හි නිශ්චිත ගැලපුම් විවරණ අවසානයේ අවකල පරිවෘත්තීය අතර අතරමැදි ලෙස තෝරා ගන්නා ලදී. එක් එක් විශේෂාංගය සඳහා උච්ච විවරණ අතිරේක දත්ත 3 හි ඇතුළත් කර ඇත. සාරාංශ-සාමාන්‍යකරණය කරන ලද පරිවෘත්තීය බහුලතාවයේ ඒකවිචල්‍ය විශ්ලේෂණය සඳහා MetaboAnalyst 5.0 භාවිතා කරන ලදී. සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් පරිවෘත්තීය මත පදනම්ව KEGG මාර්ග පොහොසත් කිරීමේ විශ්ලේෂණය ද MetaboAnalyst 5.0 ඇගයීමට ලක් කළේය. ප්‍රධාන සංරචක විශ්ලේෂණය (PCA) සහ අර්ධ අවම වර්ග වෙනස්කම් කිරීමේ විශ්ලේෂණය (PLS-DA) ropls මෘදුකාංග පැකේජය (v.1.26.4) භාවිතයෙන් තොග සාමාන්‍යකරණය සහ ස්වයංක්‍රීය පරිමාණය සමඟ විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ගැටිති මාරාන්තික බව පුරෝකථනය කිරීම සඳහා ප්‍රශස්ත පරිවෘත්තීය ජෛව මාර්කර් ආකෘතිය ජනනය කරන ලද්දේ අවම නිරපේක්ෂ හැකිලීම සහ තේරීම් ක්‍රියාකරු (LASSO, R පැකේජය v.4.1-3) සහිත ද්විමය ලොජිස්ටික් ප්‍රතිගාමීත්වය භාවිතා කරමිනි. හඳුනාගැනීමේ සහ වලංගු කිරීමේ කට්ටලවල වෙනස්කම් කිරීමේ ආකෘතියේ ක්‍රියාකාරිත්වය pROC පැකේජයට අනුව ROC විශ්ලේෂණය මත පදනම්ව AUC ඇස්තමේන්තු කිරීම මගින් සංලක්ෂිත විය (v.1.18.0.). ආකෘතියේ උපරිම යූඩන් දර්ශකය (සංවේදීතාව + නිශ්චිතතාව - 1) මත පදනම්ව ප්‍රශස්ත සම්භාවිතා කඩඉම ලබා ගන්නා ලදී. සීමාවට වඩා අඩු හෝ වැඩි අගයන් සහිත සාම්පල පිළිවෙලින් නිරපේක්ෂ ගැටිති සහ පෙනහළු ඇඩිනොකාර්සිනෝමා ලෙස පුරෝකථනය කෙරේ.
A549 සෛල (#CCL-185, ඇමරිකානු වර්ගයේ සංස්කෘතික එකතුව) 10% FBS අඩංගු F-12K මාධ්‍යයෙන් වගා කරන ලදී. SLC7A5 ඉලක්ක කරගත් කෙටි කෙස් කටු RNA (shRNA) අනුපිළිවෙලක් සහ ඉලක්කගත නොවන පාලනයක් (NC) ලෙන්ටිවයිරල් දෛශිකය pLKO.1-puro තුළට ඇතුළත් කරන ලදී. shSLC7A5 හි ප්‍රති-සංවේදක අනුපිළිවෙල පහත පරිදි වේ: Sh1 (5′-GGAGAAACCTGATGAACAGTT-3′), Sh2 (5′-GCCGTGGACTTCGGGAACTAT-3′). SLC7A5 (#5347) සහ ටියුබුලින් (#2148) සඳහා ප්‍රතිදේහ සෛල සංඥා තාක්ෂණයෙන් මිලදී ගන්නා ලදී. SLC7A5 සහ ටියුබුලින් සඳහා ප්‍රතිදේහ 1:1000 තනුක කිරීමේදී බටහිර බ්ලොට් විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කරන ලදී.
සීහෝර්ස් XF ග්ලයිකොලිටික් ආතති පරීක්ෂණය බාහිර සෛලීය ආම්ලිකකරණය (ECAR) මට්ටම් මනිනු ලබයි. විශ්ලේෂණයේදී, ECAR මගින් මනිනු ලබන සෛලීය ග්ලයිකොලිටික් ධාරිතාව පරීක්ෂා කිරීම සඳහා ග්ලූකෝස්, ඔලිගොමයිසින් A සහ ​​2-DG අනුපිළිවෙලින් පරිපාලනය කරන ලදී.
ඉලක්කගත නොවන පාලනය (NC) සහ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) සමඟ සම්ප්‍රේෂණය කරන ලද A549 සෛල සෙන්ටිමීටර 10 ක විෂ්කම්භයක් සහිත භාජනවල එක රැයකින් ආලේප කරන ලදී. සෛල පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය අයිස්-සීතල 80% ජලීය මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 1 කින් නිස්සාරණය කරන ලදී. මෙතනෝල් ද්‍රාවණයේ සෛල ඉවත් කර, නව නළයකට එකතු කර, 4°C දී මිනිත්තු 15 ක් සඳහා 15,000 × g දී කේන්ද්‍රාපසාරී කරන ලදී. සුපිරි ද්‍රව්‍ය 800 µl එකතු කර අධිවේගී රික්ත සාන්ද්‍රකයක් භාවිතයෙන් වියළන්න. ඉහත විස්තර කර ඇති පරිදි LC-MS/MS භාවිතයෙන් ට්‍රිප්ටෝෆාන් මට්ටම් සඳහා වියළන ලද පරිවෘත්තීය පෙති විශ්ලේෂණය කරන ලදී. නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් අනුව A549 සෛලවල (NC සහ shSLC7A5) සෛලීය NAD(H) මට්ටම් ප්‍රමාණාත්මක NAD+/NADH වර්ණමිතික කට්ටලයක් (#K337, BioVision) භාවිතයෙන් මනිනු ලැබීය. පරිවෘත්තීය ප්‍රමාණය සාමාන්‍යකරණය කිරීම සඳහා සෑම සාම්පලයක් සඳහාම ප්‍රෝටීන් මට්ටම් මනිනු ලැබීය.
නියැදි ප්‍රමාණය මූලික වශයෙන් තීරණය කිරීම සඳහා සංඛ්‍යානමය ක්‍රම භාවිතා කර නොමැත. ජෛව මාර්කර් සොයා ගැනීම 15, 18 ඉලක්ක කරගත් පෙර පරිවෘත්තීය අධ්‍යයනයන් ප්‍රමාණය තීරණය කිරීම සඳහා මිණුම් සලකුණු ලෙස සලකනු ලැබ ඇති අතර, මෙම වාර්තා හා සසඳන විට, අපගේ නියැදිය ප්‍රමාණවත් විය. අධ්‍යයන කණ්ඩායමෙන් සාම්පල කිසිවක් බැහැර කර නොමැත. සෙරුම් සාම්පල අහඹු ලෙස සොයාගැනීම් කණ්ඩායමකට (අවස්ථා 306, 74.6%) සහ ඉලක්ක නොකළ පරිවෘත්තීය අධ්‍යයනයන් සඳහා අභ්‍යන්තර වලංගුකරණ කණ්ඩායමකට (අවස්ථා 104, 25.4%) පවරා ඇත. ඉලක්කගත පරිවෘත්තීය අධ්‍යයනයන් සඳහා සොයාගැනීම් කට්ටලයෙන් අපි එක් එක් කණ්ඩායමෙන් අහඹු ලෙස අවස්ථා 70 ක් ද තෝරා ගත්තෙමු. LC-MS දත්ත රැස් කිරීම සහ විශ්ලේෂණය අතරතුර විමර්ශකයින් කණ්ඩායම් පැවරුමට අන්ධ කරන ලදී. පරිවෘත්තීය දත්ත සහ සෛල අත්හදා බැලීම්වල සංඛ්‍යානමය විශ්ලේෂණයන් අදාළ ප්‍රතිඵල, රූප පුරාවෘත්ත සහ ක්‍රම අංශවල විස්තර කර ඇත. සෛලීය ට්‍රිප්ටෝෆාන්, NADT සහ ග්ලයිකොලිටික් ක්‍රියාකාරකම් ප්‍රමාණනය කිරීම සමාන ප්‍රතිඵල සමඟ තුන් වරක් ස්වාධීනව සිදු කරන ලදී.
අධ්‍යයන සැලසුම පිළිබඳ වැඩිදුර තොරතුරු සඳහා, මෙම ලිපිය හා සම්බන්ධ ස්වාභාවික කළඹ වාර්තා සාරාංශය බලන්න.
උපුටා ගත් ලක්ෂණ වල අමු MS දත්ත සහ යොමු සෙරුමයේ සාමාන්‍යකරණය කළ MS දත්ත පිළිවෙලින් පරිපූරක දත්ත 1 සහ පරිපූරක දත්ත 2 හි දක්වා ඇත. අවකල ලක්ෂණ සඳහා උපරිම විවරණ පරිපූරක දත්ත 3 හි දක්වා ඇත. LUAD TCGA දත්ත කට්ටලය https://portal.gdc.cancer.gov/ වෙතින් බාගත කළ හැක. ප්‍රස්ථාරය සැලසුම් කිරීම සඳහා ආදාන දත්ත මූලාශ්‍ර දත්තවල දක්වා ඇත. මෙම ලිපිය සඳහා මූලාශ්‍ර දත්ත සපයා ඇත.
ජාතික පෙනහළු පරීක්ෂණ අධ්‍යයන කණ්ඩායම, ආදිය. අඩු මාත්‍රාවකින් යුත් පරිගණක ටොමොග්‍රැෆි සමඟ පෙනහළු පිළිකා මරණ අනුපාතය අඩු කිරීම. උතුරු එංගලන්තය. ජේ. මෙඩ්. 365, 395–409 (2011).
ක්‍රේමර්, බීඑස්, බර්ග්, කේඩී, ඇබර්ල්, ඩීආර් සහ ප්‍රොෆෙට්, පීසී අඩු මාත්‍රාවකින් යුත් හෙලික්සීය සීටී භාවිතයෙන් පෙනහළු පිළිකා පරීක්ෂාව: ජාතික පෙනහළු පරීක්ෂණ අධ්‍යයනයේ (එන්එල්එස්ටී) ප්‍රතිඵල. ජේ. මෙඩ්. තිරය 18, 109–111 (2011).
ඩි කොනිං, එච්ජේ, සහ තවත් අය. අහඹු ලෙස කරන ලද අත්හදා බැලීමකදී පරිමාමිතික CT පරීක්ෂාව සමඟ පෙනහළු පිළිකා මරණ අනුපාතය අඩු කිරීම. උතුරු එංගලන්තය. ජේ. මෙඩ්. 382, ​​503–513 (2020).